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Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1807/1998

Title: ULTRAMICROANALISIS PARA LA CUANTIFICACION DE ANTIGENO CARCINOEMBRIONARIO EN SUERO
Authors: Velandia, Alvaro
Nunez, Gilda
Robaina, Rene
Keywords: Biotechnology
EIA, colorectal cancer, CEA ba95005
Issue Date: 1995
Publisher: Elfos Scientiae
Citation: Biotecnologia Aplicada 12(1)
Abstract: An Ultramicroelisa (sandwich) system, using both, monoclonal and polyclonal antibodies against Carcinoembryonic antigen (CEA), was developed. The lowest detection limit of the assay is 600 pg/mL of CEA in human serum and has 3 incubation steps which can be performed in two days. Polyvinylchloride plates coated with monoclonal antibody ior-CEA1 specific against CEA are first incubated with human serum samples. Bound CEA is detected by addition of polyclonal antibodies raised in sheep labeled with beta--Galactosidase. The developed colour is proportional to the amount of CEA present in samples. Some features of the system like intra and interassay variation (5.7% and 9.4% variation coefficients respectively), dilution studies and parallelism test, system accuracy (105% recovery) are reported. An optimal correlation (r=0.9892) was found by comparison of our system with a CEA ENZELSA kit developed by CIS (CIS, Gif-Sur-Yvette, France). Also, our standard curve was compared with the standard of the National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC, London, England), showing very similar behaviour. Samples of normal adult population (n=14 459) presented a mean value of 3 ng/mL of CEA while 21 colon cancer samples shown a mean values of 59 ng/mL. RESUMEN En el presente trabajo se reporta el desarrollo de un Ultramicroelisa tipo sandwich utilizando anticuerpos monoclonales y policlonales dirigidos contra el antigeno carcinoembrionario (CEA). El limite de deteccion del ensayo es de 600 pg/mL de CEA en suero humano y tiene tres pasos de incubacion que pueden realizarse en dos dias. El anticuerpo monoclonal ior-CEA1 especifico para este antigeno se utiliza como anticuerpo de recubrimiento en placas de polivinilo, a las que se anaden posteriormente las muestras de suero humano. El CEA unido se detecta anadiendo anticuerpos policlonales anti CEA obtenidos en carnero y marcados con beta-galactosidasa. El color desarrollado es proporcional a la cantidad de CEA presente en las muestras. Se reportan algunas caracteristicas del ensayo como son variacion intra (5,7%) e interensayo (9,4%), estudios de dilucion, prueba de paralelismo y exactitud (105% de recobrado). Un coeficiente de correlacion r=0.9892 fue hallado al comparar el presente sistema con el ensayo ENZELSA para la cuantificacion de CEA de la compania CIS (Gif-Sur-Yvette, Francia). Ademas, la curva de calibracion fue comparada con el patron del Instituto Nacional de Patrones Biologicos y Control (NIBSC, Londres, Inglaterra), mostrando un comportamiento muy similar. Se ensayaron muestras provenientes de poblacion normal adulta (n=14 459) obteniendose un valor promedio de 3 ng/mL. Para el grupo de pacientes con cancer de colon y recto (n =21) el valor medio fue de 59 ng/mL.
URI: http://bioline.utsc.utoronto.ca/archive/00000996/01/ba95005.pdf
http://hdl.handle.net/1807/1998
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